生物实验报告（精选17篇）
实验五比较酶和Fe3+的催化效率
考点提示：
(1)为何要选新鲜的肝脏?因为在不新鲜的肝脏中，过氧化氢酶的活性会由于细菌的破坏而降低。
(2)该实验中所用试管应选较粗的还是较细的?为什么?应选用较粗的，因为在较细的试管中容易形成大量的气泡，而影响卫生香的复燃。
(3)为何要选动物的肝脏组织来做实验，其他动植物的组织的研磨液能替代吗?因为肝脏组织中过氧化氢酶含量较丰富;其它动植物组织也含有少量的过氧化氢酶，所以能够替代。
(4)相同质量的块状肝脏和肝脏研磨液，哪一个催化效果好?为什么?研磨液效果好;因为它增加过氧化氢酶与过氧化氢的接触面积。
(5)滴入肝脏研磨液和氯化铁溶液时，可否共用下个吸管?为什么?不可共用，防止过氧化氢酶与氯化铁混合，而影响实验效果。
实验六色素的提取和分离
1、原理：叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂丙酮或无水乙醇——提取色素
各色素在层析液中的`溶解度不同，随层析液在滤纸上扩散速度不同——分离色素
2、步骤：
(1)提取色素研磨
(2)制备滤纸条
(3)画滤液细线：均匀，直，细，重复若干次
(4)分离色素：不能让滤液细线触及层析液
(5)观察和记录：结果滤纸条上从上到下依次为：橙黄色(胡萝卜素)、黄色(叶黄素)、蓝绿色(叶绿素a)、黄绿色(叶绿素b)。
考点提示：
(1)对叶片的要求?为何要去掉叶柄和粗的时脉?绿色、是深绿色。因为叶柄和叶脉中所含色素很少。
(2)二氧化硅的作用?不加二氧化硅对实验有何影响?
为了使研磨充分。不加二氧化硅，会使滤液和色素带的颜色变浅。
(3)丙酮的作用?它可用什么来替代?用水能替代吗?
溶解色素。它可用酒精等有机溶剂来代替，但不能用水来代替，因为色素不溶于水。
(4)碳酸钙的作用?不加碳酸钙对实验有何影响?
保护色素，防止在研磨时叶绿体中的色素受到破坏。不加碳酸钙，滤液会变成黄绿色或褐色。
(5)研磨为何要迅速?要充分?过滤时为何用布不用滤纸?研磨迅速，是为了防止丙酮大量挥发;只有充分研磨，才能使大量色素溶解到丙酮中来。色素不能通过滤纸，但能通过尼龙布。
(6)滤纸条为何要剪去两角?防止两侧层析液扩散过快。
(7)为何不能用钢笔或圆珠笔画线?因为钢笔水或圆珠笔油中含有其它色素，会影响色素的分离结果。
(8)滤液细线为何要直?为何要重画几次?防止色素带的重叠;增加色素量，使色素带的颜色更深一些。
(9)滤液细线为何不能触到层析液?防止色素溶解到层析液中。
(10)滤纸条上色素为何会分离?
由于不同的色素在层析液中的溶解度不同，因而它们随层析液在滤纸条上的扩散速度就不同。
(11)色素带最宽的是什么色素?它在层析液中的溶解度比什么色素大一些?
最宽的色素带是叶绿素a，它的溶解度比叶绿素b大一些。
(12)滤纸条上相互间距的是哪两种色素?胡萝卜素和叶黄素。
(13)色素带最窄的是第几条色素带?为何?
第一条色素带，因为胡萝卜素在叶绿体的四种色素中含量最少。
实验七观察质壁分离和复原
1、条件：细胞内外溶液浓度差，活细胞，大液泡
2、材料：紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞(具紫色大液泡)，质量浓度0.3g/mL的蔗糖溶液，清水等。
3、步骤：制作洋葱鳞片叶外表皮细胞临时装片→观察→盖玻片一侧滴蔗糖溶液，另一侧用吸水纸吸引→观察(液泡由大到小，颜色由浅变深，原生质层与细胞壁分离)→盖玻片一侧滴清水，另一侧用吸水纸吸引→观察(质壁分离复原)
4、结论：细胞外溶液浓度>细胞内溶液浓度，细胞失水质壁分离
细胞外溶液浓度<细胞内溶液浓度，细胞吸水质壁分离复原
知识概要：制片观察加液观察加水观察
考点提示：
(1)洋葱为何要选紫色的?若紫色过淡怎么办?
紫色的洋葱有紫色的大液泡，便于观察液泡的大小变化;缩小光圈，使视野变暗些。
(2)洋葱表皮应撕还是削?为何?表皮应撕不能削，因为削的表皮往往太厚。
(3)植物细胞为何会出现质壁分离?动物细胞会吗?当细胞失去水分时，其原生质层的伸缩性大于细胞壁的伸缩性;动物细胞不会发生质壁分离，因为动物细胞没有细胞壁。
(4)质壁分离时，液泡大小和颜色的变化?复原时呢?
细胞发生质壁分离时，液泡变小，紫色加深;当细胞质壁分离复原时，液泡变大，紫色变浅。
(5)若发生质壁分离后的细胞，不能发生质壁分离复原，其原因是什么?
细胞已经死亡(可能是外界溶液浓度过大，细胞失水过多或质壁分离时间过长)
(6)高倍镜使用前，装片如何移动?
若要把视野中上方的物像移到视野的正中心，则要将装片继续向上移动。若要把视野中左方的物像移到视野的正中心，则要将装片继续向左方移动，因为显微镜视野中看到的是倒像。
(7)换高倍物镜后，怎样使物像清晰?视野明暗度会怎样变化?如何调亮?换高倍物镜后，应调节细准焦螺旋使物像变得清晰;视野会变暗，可调大光圈或改用反光镜的凹面镜来使视野变亮。
(8)所用目镜、物镜的长度与放大倍数的关系?目镜越长，放大倍数越小;物镜越长，放大倍数越大。
(9)物像清晰后，物镜与载玻片之间的距离和放大倍数的关系?
物镜与载玻片之间的距离越小，放大倍数越大。
(10)总放大倍数的计算方法?放大倍数具体指面积的放大倍数还是长度的放大倍数?
总放大倍数等于目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积;放大倍数是指细小物体长度或宽度的放大倍数。
(11)放大倍数与视野中细胞大小、多少、视野明暗的关系?
放大倍数越大，视野中细胞越大、数目越少、视野越暗。
(12)更换目镜，若异物消失，则异物在目镜上;更换物镜，若异物消失，则异物在物镜上、移动载玻片，若异物移动，则异物在载玻片上。
(13)怎样利用质壁分离现象来测定植物细胞液的浓度?①配制一系列浓度从小到大的蔗糖溶液②分别用以上不同浓度的溶液制成某植物细胞的临时装片③用显微镜观察某植物细胞是否发生质壁分离。某植物细胞液的浓度就介于不能引起质壁分离的浓度和能引起质壁分离的浓度之间。
用高倍显微镜观察叶绿体和细胞质流动
1、初步掌握高倍显微镜的使用方法。
2、观察高等植物的叶绿体在细胞质基质中的形态和分布。
高等植物的叶绿体呈椭球状，在不同的光照条件下，叶绿体可以运动，改变椭球体的方向，这样既能接受较多的光照，又不至于被强光灼伤。在强光下，叶绿体以其椭球体的侧面朝向光源；在弱光下，叶绿体以其椭球体的正面朝向光源。因此，在不同光照条件下采集的葫芦藓，其小叶内叶绿体椭球体的形状不完全一样。活细胞中的细胞质处于不断的流动状态，观察细胞质的流动，可以用细胞质基质中的.叶绿体的运动做为标志。
步骤：制作藓类叶片的临时装片；用显微镜观察叶绿体；制作黑藻叶片临时装片；用显微镜观察细胞质流动
3、材料：藓类的叶，新鲜的黑藻，显微镜，载玻片，盖玻片，滴管，镊子，刀片，培养皿，铅笔
4、问题：细胞质基质中的叶绿体是否静止不动，为什么？叶绿体的形态和分布与叶绿体的功能有什么关系？植物细胞的细胞质处于不断的流动状态，这对于活细胞完成生命活动有什么意义？用铅笔画一个叶片细胞，标出叶绿体的大致流动方向。
一、实验目的
1.观察植物细胞有丝分裂的过程，识别有丝分裂的不同时期。
2.初步掌握制作洋葱根尖有丝分裂装片的技能。
3.初步掌握绘制生物图的方法。
二、实验原理
在植物体中，有丝分裂常见于根尖、茎尖等分生区细胞，高等植物细胞有丝分裂的过程，分为分裂间期和分裂期的前期、中期、后期、末期。可以用高倍显微镜观察植物细胞的有丝分裂的过程，根据各个时期细胞内染色体(或染色质)的变化情况，识别该细胞处于有丝分裂的哪个时期，细胞核内的染色体容易被碱性染料着色。
三、材料用具
洋葱根尖、显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、镊子、培养皿、铅笔、质量分数为15%的盐酸、体积分数为95%的酒精、质量分数为0.01g/ml的龙胆紫(或紫药水)
四、实验过程(见书p39)
1.洋葱根尖的培养(提前3—4天)
2.解离:5min
3.漂洗:10min
4.染色:5min
5.制片
6.镜检
五、注意
1.解离充分是实验成功的必备条件。解离充分，组织才能分散，细胞也不会重叠。
2.漂洗时间一定要足够，否则细胞染不上色。
3.染色时，染液的浓度和染色时间必须掌握好。特别是染色不能过深，否则镜下一片紫色，无法观察。
六、讨论
1.制作好洋葱根尖有丝分裂装片的关键是什么?谈谈你自己的体会。
2.在观察清楚有丝分裂各个时期的细胞以后，绘出洋葱根尖细胞有丝分裂的简图，并标明时期。
生物实验工作计划
实验室是学生学习和进行实验的主要场所，是生物探究学习的主要资源，是学生进行科学探究的重要方式。因此，学校高度重视生物实验室建设，配置必要的仪器和设备，确保每个学生都能进行实验探究活动，为学生开展实验探究活动创造了良好的条件。通过实验，使学生最有效地掌握进一步学习现代科学技术所必需的基础生物知识，培养初步的实践操作技能和创新能力。教学的重点放在培养学生科学实验能力与提高学生科学实验素养，使学生在获取知识的同时提高自学能力、运用知识的综合分析能力、动手能力和设计创新能力。
一、指导思想
本着为学生服务的思想，大力配合学科老师开展实验教学，培养学生熟练的实验操作技能。
二、重点工作
1、为新课程教学配备新的实验仪器。
2、保证每个实验按要求保质保量及时开出。
3、配合任科老师做好各年段学生实验强化课本知识的学习工作。
三、具体工作
1、100%开出演示实验、学生实验，并按要求(保证数量和质量)在教师上课前布置好每个实验，决不拖延时间影响教学。
2、上实验课时，(在我没课的情况下)去实验室巡视，帮助老师排除故障，解难释疑。仪器坏了、试剂不够，进行维修和补齐，指导帮助学生纠正错误的操作方法。
3、实验完毕，及时检查仪器的数量和质量，如有差错按制度处理;及时补充试剂量，保证下个实验的顺利进行;做好有关的实验记录(如时间、人数、容易出故障的地方及改进办法等)。
4、完善各项管理制度，如《实验室、仪器室使用管理制度》、《实验室安全守则》、《实验室有关玻璃破损赔偿规定》等，并上墙。经常打扫卫生，做到仪器无尘、教室整洁。
5、期初、期末各进行一次帐物校对，做到两者相符，并做好有关的报损记录。平时经常查看实验仪器和实验用品，能修的及时修理，不足的及时购买。
6、补充新课程教学所需的实验器材。
四、强化安全意识，确保实验室安全
确保实验室安全，明确实验室职责，定期检查灭火器材及其他设备，建立管理责任人自查，实验室组织抽查的安全检查制度。强化安全意识。
以实验室安全责任人为主、实验指导教师配合、系领导关心支持、学生配合，确保实验室全年不出现各种安全事故。
年级班实验人：组次：试验时间：
一、探究目的
1、通过探究帮助学生理解桦尺蠖体色变化的`整个过程。
2、理解保护色对生物生存的意义。
二、探究步骤
1、发现并提出问题：______________________________________。
2、作出假设：___________________________________________________ 。
3、制定计划：
4、实施计划：认真记录和分析探究的过程和结果和。
5、得出结论：_________________________________________________________ 。
6、表达交流。
三、讨论
1、第一代和第二代之间有什么变化？
2、第一代和第五代之间又有什么变化？
3、你能推测保护色的形成过程吗？从中你能简单分析生物进化的原因吗？
实验生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
一、实验目的
初步掌握鉴定生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。
二、实验原理
1.还原糖的鉴定原理生物组织中普遍存在的还原糖种类较多，常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖。它们的分子内都含有还原性基团(游离醛基或游离酮基)，因此叫做还原糖。蔗糖的分子内没有游离的半缩醛羟基，因此叫做非还原性糖，不具有还原性。本实验中，用斐林试剂只能检验生物组织中还原糖存在与否，而不能鉴定非还原性糖。
斐林试剂由质量浓度为0.1g/ml的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g/ml的硫酸铜溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡蓝色的cu(oh)2沉淀。cu(oh)2与加入的葡萄糖在加热的条件下，能够生成砖红色的cu2o沉淀，而葡萄糖本身则氧化成葡萄糖酸。其反应式如下:
ch2oh—(choh)4—cho+2cu(oh)2→ch2oh—(choh)4—cooh+cu2o↓+2h2o
用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液的颜色变化过程为:浅蓝色棕色砖红色(沉淀)。
2.蛋白质的鉴定原理鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂。双缩脲试剂的成分是质量浓度为0.1g/ml的氢氧化钠溶液(a)和质量浓度为0.01g/ml(b)的硫酸铜溶液。在碱性溶液(naoh)中，双缩脲(h2noc—nh—conh2)能与cu2+作用，形成紫色或紫红色的络合物，这个反应叫做双缩脲反应。由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此，蛋白质可与双缩脲试剂发生颜色反应。
3.脂肪的鉴定原理脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色，被苏丹Ⅳ染成红色
三、实验过程(见书p18)
四、实验用品(见书p18)
五、注意
1.关于鉴定还原糖的实验，在加热试管中的溶液时，应该用试管夹夹住试管上部，并放入盛开水的大烧杯中加热。注意试管底部不要接触烧杯底部，同时试管口不要朝向实验者，以免试管内溶液沸腾时冲出试管，造成烫伤。如果试管内溶液过于沸腾，可以上提试管夹，使试管底部离开大烧杯中的开水。
2.斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后方可使用，切勿将甲液和乙液分别加入组织样液中。
3.蛋白质的鉴定中先加双缩脲a，再加双缩脲b
六、讨论
鉴定生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的根据是什么?
实验一观察DNA和RNA在细胞中的分布
实验原理：DNA绿色，RNA红色
分布：真核生物DNA主要分布在细胞核中，线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA;RNA主要分布在细胞质中。
实验结果：细胞核呈绿色，细胞质呈红色。
实验二物质鉴定
还原糖+斐林试剂砖红色沉淀
脂肪+苏丹III橘黄色
脂肪+苏丹IV红色
蛋白质+双缩脲试剂紫色反应
1、还原糖的检测
(1)材料的选取：还原糖含量高，白色或近于白色，如苹果，梨，白萝卜。
(2)试剂：斐林试剂(甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液)，现配现用。
(3)步骤：取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL(斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入)→水浴加热2min左右→观察颜色变化(白色→浅蓝色→砖红色)
★模拟尿糖的检测
1、取样：正常人的尿液和糖尿病患者的尿液
2、检测方法：斐林试剂(水浴加热)或班氏试剂或尿糖试纸
3、结果：(用斐林试剂检测)试管内发生出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液，未出现砖红色沉淀的是正常人的尿液。
4、分析：因为糖尿病患者的尿液中含有还原糖，与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀，而正常人尿液中无还原糖，所以没有发生反应。
2、脂肪的检测
(1)材料的选取：含脂肪量越高的组织越好，如花生的子叶。
(2)步骤：制作切片(切片越薄越好)将最薄的花生切片放在载玻片中央
染色(滴苏丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的.酒精)
制作装片(滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片)
镜检鉴定(显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒)
3、蛋白质的检测
(1)试剂：双缩脲试剂(A液：0.1g/mL的NaOH溶液，B液：0.01g/mL的CuSO4溶液)
(2)步骤：试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL，摇匀→加双缩尿试剂B液4滴，摇匀→观察颜色变化(紫色)
考点提示：
(1)常见还原性糖与非还原性糖有哪些?
葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖;淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。
(2)还原性糖植物组织取材条件?
含糖量较高、颜色为白色或近于白色，如：苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。
(3)研磨中为何要加石英砂?不加石英砂对实验有何影响?
加石英砂是为了使研磨更充分。不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少，使鉴定时溶液颜色变化不明显。
(4)斐林试剂甲、乙两液的使用方法?混合的目的?为何要现混现用?
混合后使用;产生氢氧化铜;氢氧化铜不稳定。
(5)还原性糖中加入斐林试剂后，溶液颜色变化的顺序为：浅蓝色棕色砖红色
(6)花生种子切片为何要薄?只有很薄的切片，才能透光，而用于显微镜的观察。
(7)转动细准焦螺旋时，若花生切片的细胞总有一部分清晰，另一部分模糊，其原因一般是什么?切片的厚薄不均匀。
(8)脂肪鉴定中乙醇作用?洗去浮色。
(9)双缩脲试剂A、B两液是否混合后用?先加A液的目的。怎样通过对比看颜色变化?
不能混合;先加A液的目的是使溶液呈碱性;先留出一些大豆组织样液做对比。
实验三观察叶绿体和细胞质流动
1、材料：新鲜藓类叶、黑藻叶或菠菜叶，口腔上皮细胞临时装片
2、原理：叶绿体在显微镜下观察，绿色，球形或椭球形。
用健那绿染液染色后的口腔上皮细胞中线粒体成蓝绿色，细胞质接近无色。
知识概要：
取材制片低倍观察高倍观察
考点提示：
(1)为什么可直接取用藓类的小叶，而不能直接取用菠菜叶?
因为藓类的小叶很薄，只有一层细胞组成，而菠菜叶由很多层细胞构成。
(2)取用菠菜叶的下表皮时，为何要稍带些叶肉?
表皮细胞除保卫细胞外，一般不含叶绿体，而叶肉细胞含较多的叶绿体。
(3)怎样加快黑藻细胞质的流动速度?最适温度是多少?进行光照、提高水温、切伤部分叶片;25℃左右。
(4)对黑藻什么部位的细胞观察，所观察到的细胞质流动的现象最明显?叶脉附近的细胞。
(5)若视野中某细胞中细胞质的流动方向为顺时针，则在装片中该细胞的细胞质的实际流动方向是怎样的?仍为顺时针。
(6)是否一般细胞的细胞质不流动，只有黑藻等少数植物的细胞质才流动?
否，活细胞的细胞质都是流动的。
(7)若观察植物根毛细胞细胞质的流动，则对显微镜的视野亮度应如何调节?
视野应适当调暗一些，可用反光镜的平面镜来采光或缩小光圈。
(8)在强光照射下，叶绿体的向光面有何变化?叶绿体的受光面积较小有一面面向光源实验四观察有丝分裂。
1、材料：洋葱根尖(葱，蒜)
2、步骤：
(一)洋葱根尖的培养
(二)装片的制作
制作流程：解离→漂洗→染色→制片
1.解离：药液：质量分数为15%的盐酸，体积分数为95%的酒精(1：1混合液)。时间：3~5min.目的：使组织中的细胞相互分离开来。
2.漂洗：用清水漂洗约10min.目的：洗去药液，防止解离过度，并有利于染色。
3.染色：用质量浓度为0.01g/mL或0.02g/mL的龙胆紫溶液(或醋酸洋红液)染色3~5min。目的：使染色体着色，利于观察。
4.制片：将根尖放在载玻片上，加一滴清水，并用镊子把根尖弄碎，盖上盖玻片，在盖玻片上再加一片载玻片。然后用拇指轻轻地按压载玻片。目的：使细胞分散开来，有利于观察。
(三)观察
1、先在低倍镜下找到根尖分生区细胞：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞正在分裂。
2、换高倍镜下观察：分裂中期→分裂前、后、末期→分裂间期。(注意各时期细胞内染色体形态和分布的特点)。其中，处于分裂间期的细胞数目最多。
考点提示：
(1)培养根尖时，为何要经常换水?增加水中的氧气，防止根进行无氧呼吸造成根的腐烂。
(2)培养根尖时，应选用老洋葱还是新洋葱?为什么?应选用旧洋葱，因为新洋葱尚在休眠，不易生根。
(3)为何每条根只能用根尖?取根尖的时间是何时?为何?
因为根尖分生区的细胞能进行有丝分裂;上午10时到下午2时;因为此时细胞分裂活跃。
(4)解离和压片的目的分别是什么?压片时为何要再加一块载玻片?解离是为了使细胞相互分离开来，压片是为了使细胞相互分散开来;再加一块载玻片是为了受力均匀，防止盖玻片被压破。
(5)若所观察的组织细胞大多是破碎而不完整的，其原因是什么?压片时用力过大。
(6)解离过程中盐酸的作用是什么?丙酮可代替吗?分解和溶解细胞间质;不能，而硝酸可代替。
(7)为何要漂洗?洗去盐酸便于染色。
(8)细胞中染色最深的结构是什么?染色最深的结构是染色质或染色体。
(9)若所观察的细胞各部分全是紫色，其原因是什么?
染液浓度过大或染色时间过长。
(10)为何要找分生区?分生区的特点是什么?能用高倍物镜找分生区吗?为什么?
因为在根尖只有分生区的细胞能够进行细胞分裂;分生区的特点是：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞处于分裂状态;不能用高倍镜找分生区，因为高倍镜所观察的实际范围很小，难以发现分生区。
(11)分生区细胞中，什么时期的细胞最多?为什么?间期;因为在细胞周期中，间期时间最长。
(12)所观察的细胞能从中期变化到后期吗?为什么?
不能，因为所观察的细胞都是停留在某一时期的死细胞。
(13)观察洋葱表皮细胞能否看到染色体?为什么?不能，因为洋葱表皮细胞一般不分裂。
(14)若观察时不能看到染色体，其原因是什么?
没有找到分生区细胞;没有找到处于分裂期的细胞;染液过稀;染色时间过短。
年级班实验人：组次：试验时间：
一、调查目的
1、认识调查研究的一般过程。掌握调查研究的基本方式。
2、通过调查，了解动物在人们日常生活中的作用。
二、调查用具
笔、记录本、照相机。
三、调查步骤
1、提出问题：____________________________________________________________？
2、作出假设：___________________________________________________ 。
3、制定计划：
4、实施计划：认真记录和分析探究的'过程和结果和。
用途所需的动物所需的动物产品食用
药用
观赏用
生活用品
其他方面
5、得出结论：_________________________________________________________ 。
6、表达交流。
四、讨论
1、通过调查活动，你是否能举例说明动物与人类的生活息息相关？
2、想一想在调查时可能遇到的困难，怎样才能使别人愿意回答你的问题，达到调查目的？
实验一:练习使用显微镜
目的要求:
1.练习使用显微镜，学会规范的操作方法。
2.能够独立操作显微镜。
3.能够将标本移动到视野中央，并看到清晰的图象。
材料用具:显微镜，写有“上”字的玻片，动、植物玻片标本，擦镜纸，纱布。
方法步骤
1.右手握住镜臂，左手托住镜座。
2.把显微镜放在实验台距边缘7厘米左右处，略偏左。安装好目镜和物镜。
3.动转换器，使低倍物镜对准通光孔。
4.把一个较大的光圈对准通光孔。一只眼注视目镜内，另一只眼睁开。转动反光镜，使光线通过通光孔反射到镜筒内。通过目镜可以看到白亮的圆形视野。
5.把所要观察的玻片标本放在载物台上，用压片夹压住，标本要正对通光孔的中心。
6.转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓下降，直到物镜接近玻片标本为止此时眼睛一定要看着物镜）。
7.一只眼向目镜内看，同时逆时针方向转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓上升直到看清物象为止。再略微转动细准焦螺旋，使看到的物象更加清晰。
8.练习将所观察的标本移到视野中央，先移动一下标本，物象朝相反的方向移动。说明了在目镜中看到的像是真实的像的倒像。
注意事项
实验完毕，把显微镜的外表擦拭干净。如需擦拭目镜和物镜，请用擦镜纸。转动转换器，把两个物镜偏到两旁，并将镜筒缓缓下降到最低处。最后把显微镜放进镜箱里，送回原处。
讨论
1.显微镜的使用步骤有哪些？
答：1、取镜和安放
2、对光
3、观察（放片、调焦）
4、清洁与收镜
2.使用显微镜观察时，为什么在下降镜筒时眼睛要注视物镜？
答：物镜把载玻片压碎，也容易划伤物镜。
3.在显微镜下能看清写在不透明纸上的“上”字吗？
答：看不到，不透明的纸会阻挡光线从物镜进入光筒再从目镜射出，所以可能什么也看不见。
实验时间：
实验二:观察植物细胞
实验目的：
1、制作植物细胞的临时装片，学习制作临时装片的基本办法.
2、认识植物细胞等基本结构.
3、练习画细胞结构图.
实验准备：
分组实验器材：显微镜、洋葱、小刀、清水、滴管、吸水纸、载玻片、盖玻片、镊子、放大镜等。
实验过程：
一、制作洋葱表皮玻片标本
1、用洁净地纱布把载玻片擦拭干净。
2、把载玻片放在实验台上，用滴管在载玻片的中央滴一滴清水。
制作临时装片
3、用镊子从洋葱鳞片叶内侧撕取一小块透明在膜——内表皮。把撕下的内表皮浸入载玻片的水滴中，用镊子把它展平。
4、用镊子夹起盖玻片，是它的一边先解除4载玻片上的水滴，然后缓缓地放下，盖在要观察的材料上，这样才能避免盖玻片下面出现气泡而影响观察。
染色
5、把一滴稀碘液滴在盖玻片的一侧。
6、用吸水纸从盖玻片的另一侧吸引，使染液浸润标本的全部。
三、观察洋葱表皮细胞
利用显微镜观察洋葱表皮细胞，先用低倍镜下观察，再在高倍镜下观察。
四、洋葱鳞片叶表皮细胞图。
五、实验结束。
回收实验器材，整理实验桌。
实验时间：
实验三：观察人体口腔上皮细胞
目的要求：
1.制作和观察人体口腔上皮细胞的临时装片
2.认识人体口腔上皮细胞的结构
3.熟练画细胞结构图
材料用具：
显微镜、吸水纸、载玻片、盖玻片、生理盐水、碘液、镊子、纱布、漱口杯、牙签方法步骤
(一)制作人口腔上皮细胞的临时装片
1.用纱布擦净载玻片、盖玻片（很薄，应轻擦）
2.在载玻片中央滴一滴生理盐水（0.9%），说明：为什么用0.9%的生理盐水，观
察洋葱表皮装片用清水，都是为了让细胞所处的环境和它们所生活的环境相同，
不至于胀破或变形，使细胞保持原状。
3.漱净口。目的：将口腔的饭粒清除，以保证所取的细胞纯度。
4.用牙签在口腔内壁轻划几下，将上面附有碎屑涂抹在生理盐水中，尽量涂均匀。
5.盖盖玻片。用镊子夹起盖玻片，使它的一侧先接触载玻片的水滴，然后慢慢放
平（注意：避免产生气泡）。
6.染色。
①在盖玻片一侧滴加稀碘液
②用吸水纸在盖玻片另一侧吸引，使染液
浸润标本的全部。
(二)用显微镜观察。
使用显微镜
①安放
②对光
③放置玻片标本，调节焦距，用眼观察，在视野中会看到被染成桔黄色的上皮细胞.
（三）绘图：
人体口腔上皮细胞模式图
（四）整理：清洁玻片，废物放在指定位置。
归纳讨论：人的口腔上皮细胞有哪些基本结构，植物细胞和动物细胞相同和不同之处。答：人的口腔上皮细胞的基本结构有细胞膜、细胞质和细胞核；植物细胞与动物细胞相比，细胞壁、叶绿体和液泡是植物细胞特有的。
实验时间：
实验四：观察人体的基本组织
目的要求：
1.观察人体基本组织的永久切片，认识人体的四种基本组织；
2.描述同一种组织中细胞的共同特点；
3.描述不同组织中细胞形态上的不同之处；
4.根据观察，概述组织的共同特点，形成组织的概念。
材料器具：
显微镜；扁平上皮、立方上皮、柱状上皮等上皮组织玻片；横纹肌、骨骼肌、心肌等肌肉组织玻片；骨、软骨、血液、韧带、肌腱、脂肪等结缔组织玻片；神经组织的玻片。
方法步骤：
1.根据教师提供的玻片，逐个在显微镜低倍镜下认真观察，注意细胞的形态特征和细胞间的联系特点。
2.根据观察，同组间的同学互相讨论，认真填写下表。
主要分布位组织类型主要特征功能举例置皮肤，消化皮肤，小肠腺上皮组织排列紧密形成表面保护，分泌道上皮四肢，躯骨骼肌，平滑肌肉组织呈长条状紧密排列干，内脏器收缩，舒张肌官支持，连接，软骨，软组结缔组织细胞之间间隙较大全身各处保护，营养织，血液产生传导兴神经组织形状独特呈发散状神经系统神经纤维奋
实验时间：
实验五：观察叶片结构
目的要求:
1，练习徒手切片.
2认识叶片的结构.
3画叶片的表皮细胞和保卫细胞图.
材料用具:
新鲜叶片，显微镜，双面刀片，镊子，载玻片，盖玻片，叶片的永久切片，盛有清水的培养皿，滴管，吸水纸，碘液，纱布，毛笔，小木板.
方法步骤:
一，练习徒手切片，制作叶片横切片的临时切片
1，把新鲜的叶片平放在小木板上.
2，右手捏紧并排的两片刀片，沿着图中虚线的方向，迅速切割.
3，刀片的夹缝中春游切下的薄片.要多切几次(每且一次，刀片要咱蘸一下税）。把切下的薄片放入水中。
4，用毛笔蘸出最薄的一片，制成临时切片。
二，观察叶片的结构
1用显微镜先观察叶片横切面的临时切片，再观察叶片的永久横切片。
2在显微镜下分清业的表皮，叶肉和叶脉。
三，观察叶片的下表皮
1用镊子撕下一小块叶片（如蚕豆叶片的`下表皮，制成临时装片。
2用显微镜进行观察，看一看叶片下表皮的细胞是什么样子的，下表皮上有没有气孔？下表皮气孔多于上表皮。
四，实验结果。
讨论：保卫细胞和它周围的细胞在结构上有什么不同？保卫细胞的这种结构特点对蒸腾作用有什么意义？
答：当水分充足时，保卫细胞膨胀张开，则气孔张开，这时，蒸腾作用很强；当水分不充足时，保卫细胞收缩关闭，则气孔关闭，这时，蒸腾作用变弱。保卫细胞能够控制气孔开关，所以也就能起到促进或减缓蒸腾作用的意义。
实验时间：
实验日期： 年月 日
组长： 组员：
一、实验要求
1、练习使用显微镜，学习规范的操作方法。
2、能够独立操作显微镜。
3、能够将玻片标本移动到视野中央，并看到清晰的图像。
二、实验原理
三、材料用具
显微镜，写有“上”字的玻片，动物、植物玻片标本，擦镜纸，纱布。
四、方法与步骤
（一）取镜和安放
1、右手握住镜臂，左手托住镜座
2、把显微镜放在实验台上，略偏左。安装好目镜和物镜。
（二）对光
3、转动转换器，使低倍物镜对准通光孔（物镜的前端与载物台要保持2厘米的距离）。
4、把一个较大的光圈对准通光孔。左眼注视目镜内（右眼睁开，便于以后同时画图）。转动反光镜，使光线通过通光孔反射到镜筒内。通过目镜，以看到白亮的视野。
（三）观察
5、把所要观察的玻片标本（也可以用印有“e”字的薄纸片制成）放在载物台上，用压片夹压住，标本要正对通光孔的中心。
6、转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓下降，直到物镜接近玻片标本为止（眼睛看着物镜，以免物镜碰到玻片标本）。
7、左眼向目镜内看，同时反方向转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓上升，直到看清物像为止。再略微转动细准焦螺旋，使看到的物像更加清晰。
注意事项：
1、实验完毕，把显微镜的外表擦拭干净。转动转换器，把两个物镜偏到峡谷旁。最后把显微镜放进镜箱里，
医学生物化学是一门为医学院各专业开设的主干课程，是联系基础医学与临床医学的重要学科，在医学教学中具有重要作用。医学生物化学实验是一门可以自成体系，有其丰富的理论、技术内容的课程，在医学生物化学教学中占有突出的地位，它不仅可以以生动形象的实验现象帮助学生加深掌握医学生物化学的理论知识，更重要的是让学生掌握实验中的各种技术的基本原理，掌握常规实验仪器的主要性能与操作方法，培养学生在实验过程中发现问题、思考问题、分析问题和解决问题的能力。
一、传统的医学生物化学实验教学的弊端
我们以前进行的生物化学实验，其实验内容和考核方法都有弊端。
1.实验内容弊端。我们以前给学生开设的实验基本上都是验证性实验，一般是理论课讲述了相关知识，接着安排这个知识点的实验课。例如，理论课讲述了蛋白质的理化性质，这次实验课的内容就为“蛋白质的沉淀凝固”。课本上的理论都是前人的实验结果，对于这样的实验学生认为缺乏挑战性，实验操作中也不主动思考。医学生物化学实验课程的验证性实验太多，不能很好地发挥学生的主观能动性，也不利于学生思维能力和创造能力的培养。
2.考核方法的弊端。我们以前的医学生物化学实验考核成绩主要是学生的实验报告，忽略了学生在写实验报告的过程中存在抄袭现象。有的学生实验操作能力很差，抄袭别人的实验报告也可得高分。这种考核标准导致学生不重视实验过程，只注重实验报告的书写，不利于培养学生的动手能力，不利于培养学生分析问题和解决问题的能力。
二、生物化学实验教学改革
1.构建新的实验教学内容。对实验项目进行改革。我们以前医学生物化学实验内容：生物化学实验的基本知识与基本技能、蛋白质的沉淀和凝固、双缩脲法测定蛋白质的含量、还原糖含量的测定、氨基酸纸层析、尿淀粉酶活性的测定、血清尿素氮含量的测定、血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳、DNA的提取与鉴定、丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制作用等。改革后的实验内为：蛋白质含量的测定（考马斯亮蓝法）、氨基酸纸层析、酶促反应动力学实验、丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制作用、葡萄糖含量的测定（葡萄糖氧化酶法）、血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳、组织DNA的提取与鉴定、碱性磷酸酶提取与鉴定等。经过对实验项目的改革，去掉部分淘汰实验和部分验证性实验，增加了分子生物学实验比例，增加了综合设计性实验项目。
综合设计性实验，就是在实践教学中，教师提出实验的总体要求，让学生自己设计实验。学生先进行分组，实验小组的各成员经过查阅文献资料、设计实验所用试剂仪器、设计实验步骤、进行预实验、制作幻灯片、小组课堂汇报这样的程序完成整个综合设计性实验。实验成功了，学生会有极大的成就感；如果有些实验不成功，带教老师进行引导，分析失败原因，再重复实验。这样，每位学生在整个实验中一直处于主体地位，避免了个别学生不动手操作、抄袭实验报告等不良行为，从而达到培养学生的创新意识，以及学生的动手、动脑能力的目的。
2.自编生化实验指导教材。我们以前所使用的.实验教材有的内容目前已淘汰，有的内容不适合医学生，因此，我们参考了周爱儒主编的《生物化学》，药立波主编的《医学分子生物学》，赵亚华主编的《生物化学与分子生物学实验技术教程》，刘吉民主编的《医学生物化学与分子生物学实验教程》等，结合我校的实际情况，编写了《医学生物化学实验技术》实验讲义。对医学生物化学实验的基本实验内容进行精心的取舍，保留经典的实验内容如葡萄糖含量的测定、氨基酸纸层析、血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳等外，增加了综合设计性实验如组织DNA的提取与鉴定、碱性磷酸酶的提取与鉴定实验等的比例。这样一方面学生可以掌握生物化学实验的分光技术、层析技术、电泳技术等基本实验技术，另一方面通过综合设计性实验培养学生的创新能力，提高学生的综合素质。
3.让学生自己准备实验。传统的生物化学实验教学注重知识传递和操作能力的培养。上实验时，老师先讲实验原理、操作步骤、可能出现的结果，准备好试剂，调试好实验仪器，学生按部就班地操作即可，完全剥夺了学生的思维空间。让学生自己准备实验，学生可以全身心地投入到整个实验的各个准备阶段，例如试剂的配制、试剂的分装、仪器的调试等，在准备的过程中会出现各种问题，学生们在老师的指导下就要去分析为什么会出现这些问题，如何去解决这些问题。学生自己准备实验可以使学生获得从书本上学不到的知识和能力，从实验中得到更多的收获。
4.先做后讲。我们以前的实验大多为验证性实验，一般是老师讲完后学生再做，有时为了得到明确的实验结果教师参与过多，学生对实验印象不深。为此，我们决定采用先做后讲的归纳式教学方法，这种方法更适用于综合设计性实验，让学生一边做实验，一边观察讨论，整个实验做完后，让学生总结规律，老师只做归纳性、提高式讲解。这样的教学方法可以引导学生感知知识的发生过程，体验获得真知的喜悦。
5.应用多媒体技术丰富实验课教学。医学生物化学这门课的知识很抽象，教师讲课难度较大。多媒体技术通过文字、图像、动画和声音等传递信息。应用多媒体技术进行医学生物化学的教学，可以生动、形象地传递较多的知识，还可以帮助师生共同突破教学中的重点和难点，极大地提高教学质量。我们以前上实验课时都采用黑板板书，操作也只做一些简单的示范。由于班级人数较多，有一些学生看不到操作示范。现在我们把多媒体技术也运用在医学生物化学实验课堂上，教师把实验原理、实验试剂、实验仪器、操作步骤等做成幻灯片，比板书看起来更清晰，把实验操作也录成视频，做实验前先看一段实验操作步骤的录像，然后再操作，避免了学生看不到操作示范，这样可提高学生实验动手能力。
6.开放实验室。为了提高学生的实验操作能力，我们决定进行实验室开放，便于学生进行综合设计性实验的预实验及学生参与教师科研的实验。
（1）带教老师给学生讲解一些常用实验仪器的使用方法及注意事项，例如：电子天平、台式低速离心机、超低温离心机、恒温培养箱、水浴箱、电泳仪、烤箱、手提式不锈钢消毒器、分光光度计、PCR仪等。由实验技术人员管理、维护实验室及其仪器。
（2）实验室开放时间：周一到周五从18∶00～22∶00，周六、周日全天开放。带教老师和实验技术人员轮流值班，随时解决学生实验过程中的问题。
年级班实验人：组次：试验时间：
一、探究目的
1、通过观察酒精或烟草浸出液对水蚤心率的影响，知道酗酒和吸烟对人体健康的危害。
2、知道生活方式和饮食习惯对人类健康的影响。
二、探究步骤
1、发现并提出问题：______________________________________ 。
2、作出假设：___________________________________________________ 。
3、制定计划：
4、实施计划：认真记录和分析探究的.过程和结果和。
5、得出结论：_________________________________________________________ 。
6、表达交流。
三、讨论
1、酒精或烟草浸出液对水蚤心率有什么影响？怎样解释这种现象？
2、酗酒和吸烟对人体健康可能有哪些危害？
3、影响人们健康的因素有哪些？
一、实验目的
1.初步学会探索酶的催化效率的方法。
2.探索过氧化氢酶和Fe3+催化效率的高低。
二、实验原理
新鲜的猪肝中含有过氧化氢酶，Fe3+是一种无机催化剂，它们都可以催化过氧化氢分解
成水和氧
三、材料用具
质量分数为20%的新鲜猪肝浆、滴管、试管、火柴、试管架、质量分数为3.5%的氯化铁溶液、体积分数为3%的过氧化氢溶液。
四、实验过程（见书P30）
五、讨论
实验中选择新鲜的猪肝是因为新鲜的猪肝中的酶活性较高，能够更有效地催化反应。另外，新鲜的.猪肝也能保证实验结果的可靠性和准确性。在滴入猪肝研磨液和氯化铁溶液时，不可以公用一个吸管。这是因为两种液体中可能含有不同的物质，通过公用一个吸管会导致交叉污染，影响实验结果的准确性和可靠性。
生物学是一门实验科学。生物新课程倡导面向全体学生、提高生物科学素养和探究性学习的课程理念。其中探究学习是让学生在主动参与的过程中进行学习，让学生在探究问题的活动中获取知识，了解科学家的工作方法和思维方法，学会科学研究所需要的各种技能，领悟科学观念，培养科学精神。这种学习的方式的中心是针对问题的探究活动，当学生面临各种让他们困惑的问题时，他就要想法寻找答案。
在解决问题时，要对问题进行推理、分析，找出问题解决的方向，然后通过观察、实验来收集事实，通过对获得的资料进行归纳、比较、统计分析，形成对问题的解释。最后通过讨论和交流进一步澄清事实，发现新的问题，对问题进行更深入的研究。
在此背景理念依据下，在教学中教学模式也将发生根本的改变，生物课将更多地开展学生的试验、讨论、交流等活动。引导学习教学模式就是在这种背景下构建的。具体的模式结构：问题——阅读、实验——分析、推理、归纳、讨论——结论。
在运用这种模式的过程中我有下面几点感触：
1、在教师的引导下学生可带者问题去阅读、分析、讨论资料，达到解决问题的目的。比如：在学习〈空中飞行的动物〉时，教师可这样引导学生；想一想，我们人要想在天空自由自在的飞翔必须先解决什么问题？
学生思考后说；一是，解决了动力问题。二是，解决了地心引力问题。教师随后提出问题：鸟是如何解决这些问题的？引导学生思考，让学生带着问题去看书、阅读、讨论、交流、的出结论。这样既可提高学生的学习兴趣，改变学习方式，又符合新课程的要求。
2、合理开发的有效地利用一切可以利用的课程资源是实现课程目标，转变学生学习方式的关键条件。知识、技能、经验、活动方式方法等都是课程资源。在学习〈水中生活的动物〉时，对于生活在我这些地方的学生来说，对水中的动物了解不多，而且上课时还不能做试验，学生缺少感性的认识，这时教师就要引导学生开发自己已有的课程资源。如：学习鱼鳍的作用时引导学生想想：独桨船和双桨船他们的桨各起什么作用？在学习鱼儿离开水为什么会死？教师可引导学生回忆：头发在水中水什么样的？从水中出来时又是什么样的？这样就很容易理解知识，解决了问题。
3、信息化是当今世界经济和社会发展的大趋势。新课程注重现代信息技术与生物新课程的整合。这样可有效地应用数字化的优势达到学习目标。教师用编制成的演示文稿、多媒体课件来引导学生学习或作为学生自主学习的资源。
在课程学习中，利用诸多的文字处理、图形图像处理、信息集成等工具，让学生对课程学习内容进行重组、创作，不仅使学生获得知识，而且能够帮助学生建构知识。但是，教师在制作多媒体课件时，把每个知识点、每个环节设计的过于完美，在教师的引导下学生很简单的就可掌握知识，完成教学任务。但也存在着弊端，这就是学生的自主学习不到位，在获得知识的过程中缺少自主探究的过程。这个问题就是我发现的问题和努力改进的方面。
目的：
1、学会提取和分离叶绿体中色素的方法。
2、比较、观察叶绿体中四种色素：理解它们的特点及与光合作用的关系
二、理论知识：
1、光合色素主要存在于高等植物叶绿体的基粒片层上，而叶绿体中的色素能溶于有机溶剂中。故要提取色素，要破坏细胞结构，破坏叶绿体膜，使基粒片层结构直接与有机溶剂接触，使色素溶解在有机溶剂中。
2、叶绿体中的色素有四种，不同色素在层析液（脂溶性强的有机溶剂）中的溶解度不同，因而随层析液的扩散速度也不同。
三、材料：
取新鲜的绿色叶片、定性滤纸、烧杯、研钵、漏斗、纱布、剪刀、小试管、培养皿、毛细吸管、量筒、有机溶剂、层析液（20份石油醚、2份丙酮、1份苯混合）、二氧化硅、碳酸钙。
四、步骤
1、提取色素：
2、制备滤纸条：
五、实验心得
生物学是一门实验科学。生物新课程倡导面向全体学生、提高生物科学素养和探究性学习的课程理念。其中探究学习是让学生在主动参与的过程中进行学习，让学生在探究问题的活动中获取知识，了解科学家的工作方法和思维方法，学会科学研究所需要的各种技能，领悟科学观念，培养科学精神。这种学习的方式的中心是针对问题的探究活动，当学生面临各种让他们困惑的问题时，他就要想法寻找答案。
在解决问题时，要对问题进行推理、分析，找出问题解决的方向，然后通过观察、实验来收集事实，通过对获得的资料进行归纳、比较、统计分析，形成对问题的解释。最后通过讨论和交流进一步澄清事实，发现新的问题，对问题进行更深入的研究。
在此背景理念依据下，在教学中教学模式也将发生根本的改变，生物课将更多地开展学生的`试验、讨论、交流等活动。引导学习教学模式就是在这种背景下构建的。具体的模式结构：问题——阅读、实验——分析、推理、归纳、讨论——结论。
在运用这种模式的过程中我有下面几点感触：
1、在教师的引导下学生可带者问题去阅读、分析、讨论资料，达到解决问题的目的。比如：在学习〈空中飞行的动物〉时，教师可这样引导学生；想一想，我们人要想在天空自由自在的飞翔必须先解决什么问题？
学生思考后说；一是，解决了动力问题。二是，解决了地心引力问题。教师随后提出问题：鸟是如何解决这些问题的？引导学生思考，让学生带着问题去看书、阅读、讨论、交流、的出结论。这样既可提高学生的学习兴趣，改变学习方式，又符合新课程的要求。
2、合理开发的有效地利用一切可以利用的课程资源是实现课程目标，转变学生学习方式的关键条件。知识、技能、经验、活动方式方法等都是课程资源。在学习〈水中生活的动物〉时，对于生活在我这些地方的学生来说，对水中的动物了解不多，而且上课时还不能做试验，学生缺少感性的认识，这时教师就要引导学生开发自己已有的课程资源。如：学习鱼鳍的作用时引导学生想想：独桨船和双桨船他们的桨各起什么作用？在学习鱼儿离开水为什么会死？教师可引导学生回忆：头发在水中水什么样的？从水中出来时又是什么样的？这样就很容易理解知识，解决了问题。
3、信息化是当今世界经济和社会发展的大趋势。新课程注重现代信息技术与生物新课程的整合。这样可有效地应用数字化的优势达到学习目标。教师用编制成的演示文稿、多媒体课件来引导学生学习或作为学生自主学习的资源。
在课程学习中，利用诸多的文字处理、图形图像处理、信息集成等工具，让学生对课程学习内容进行重组、创作，不仅使学生获得知识，而且能够帮助学生建构知识。但是，教师在制作多媒体课件时，把每个知识点、每个环节设计的过于完美，在教师的引导下学生很简单的就可掌握知识，完成教学任务。但也存在着弊端，这就是学生的自主学习不到位，在获得知识的过程中缺少自主探究的过程。这个问题就是我发现的问题和努力改进的方面。
实验目的
⒈学习并掌握动物细胞培养的无菌操作技术。
⒉了解原代细胞培养的基本方法及操作过程。
⒊学习细胞计数及营养液的配制。
实验原理
⒈细胞原代培养
原代细胞培养是指直接从动物体内获取的细胞、组织和器官，经体外培养后，直到第一次传代为止。这种培养，首先用无菌操作的方法，从动物体内取出所需的组织（或器官），经消化，分解成单个游离细胞，在人工培养下，使其不断的生长及繁殖。
细胞培养是一种操作繁琐而又要求十分严谨的实验技术。要使细胞能在体外长期生长，必须满足两个基本要求：一是供给细胞存活所必须的条件，如适量的水、无机盐、氨基酸、维生素、葡萄糖及其有关的生长因子、氧气、适宜的温度，注意外环境酸碱度与渗透压的调节。二是严格控制无菌条件。
⒉细胞死活鉴定死活细胞的鉴定方法有很多种，常用的.有染色法和仪器分析法。染色法是常用的细胞死活鉴定方法，简便，易于操作。不同的死活细胞鉴定方法有各自不同具体的反应机理，但无论采用何种办法，都是利用了死活细胞在生理机能和性质上的差异。
染色法分化学染色法和荧光染色法，根据染色机理的不同，染料或使死细胞着色，或使活细胞着色。
死活细胞在生理机能和性质上的差异主要包括：
☆死活细胞细胞膜通透性的差异：活细胞的细胞膜是一种选择性膜，对细胞起保护和屏障作用，只允许物质选择性的通过；而细胞死亡之后，细胞膜受损，通透性增加。常用的以台盼蓝鉴别细胞死活的方法就是利用了这一性质。台盼蓝，又称锥蓝，是一种阴离子型染料，不能透过完整的细胞膜。所以经台盼蓝染色后只能使死细胞着色，而活细胞不被着色。甲基蓝有类似的染色机理。植物细胞的质壁分离也可鉴定死活。
☆死活细胞在代谢上的差异：是采用美蓝染料鉴定酵母细胞死活的依据。美蓝是一种无毒染料，氧化型为蓝色，还原型为无色。由于活细胞中新陈代谢的作用，使细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝从蓝色的氧化性变为无色的还原型，因此美蓝染色后活的酵母细胞无色；而死细胞或代谢缓慢的老细胞，则因它们的无还原能力或还原能力极弱，使美蓝处于氧化态，从而被染成蓝色或淡蓝色。
除此之外，还有一些细胞器的专有染料。如液泡系的专有染料中性红。中性红是一种低毒性染料，可以使活细胞液泡着红色，而细胞质和细胞核不被着色；死细胞的液泡不被着色或浅染，染料弥散于整个细胞中，细胞核和细胞质被染成红色。有时侯为了增加染色效果可以将两种染料结合使用，如甲基蓝-中性红混合染色法。
实验用品
⒈材料小白鼠
⒉试剂
台盼蓝、伊红、PBS缓冲液、细胞培养液（含生长因子）
⒊器材
剪子、棉球、75%酒精、移液枪、无菌操作台、正置光学显微镜、倒置光学显微镜、解剖盘、滴管、离心管、离心机、注射器、Eppendorf管、培养皿、酒精灯、塑料培养皿、载玻片、盖玻片、血细胞计数板
实验步骤
⒈取材
取小鼠一只，采用断头法处死。清水洗小鼠浸入75%酒精中消毒3min，取出转入超净工作台内的解剖盘中，无菌操作打开腹腔，取出其脾脏，除去其周围的脂肪组织，并用PBS液自上而下淋洗1-2次，转入无菌培养皿中待用。
⒉分离脾细胞
用滴管向培养皿中注入30滴PBS缓冲液，再用“L”型针头注射器在皿中吸取0.2毫升PBS液注入脾脏，注射时沿长轴注射。然后再用针头在脾脏上扎眼，并用“L”型针头轻轻刮出脾细胞。在均匀吹匀脾脏细胞。
吸取上述分离的单个脾细胞悬液，放入Eppendorf管中，使量至1mL，以1000r/min离心5min。⒊培养脾细胞
取塑料培养皿一套，用移液枪吸取培养液2mL加入塑料皿中，并将皿标记待用。取离心后的Eppendorf管，弃去上清液，用移液枪（200ul）吸取塑料皿中的培养液400ul加入弃去上清的Eppendorf管中，用枪头吹匀管底的脾细胞，吸取200ul脾细胞悬液接种于上述塑料皿中，混匀后放入37°C，5%CO2的培养箱中培养。
⒋配制染液
用生理盐水配成5%台盼蓝染液，备用。⒌染色
取0.5mL细胞悬浊液放入试管中，加入1-2滴染液。混合。2-5min后将细胞放在血细胞计数板上观察死活情况，注意不要有
气泡产生，放大倍数为10x10。染色后活细胞不着色，死细胞显示蓝色。注意染色时间不能超过15min，否则染液将细胞毒杀。
⒍计数
在10x10倍的显微镜下观察，计算血细胞计数板的4个4小方格的细胞数量。包括细胞总数与死细胞数量。压线者计上不计下，计左不计右。
⒎计算细胞活力
根据公式：细胞活力=(总细胞数-死细胞数)/总细胞数×100%
实验结果
台盼蓝染色后的细胞（10x10）伊红染色后的细胞（10x10）
总细胞数和活细胞数统计表（10×10）
项目自己培养细胞老师培养细胞总细胞数个/ml活细胞数个/ml细胞活力1.4×1067.5×1053.0×1055.5×10521.4%73.3%分析与讨论
⒈结果分析
本次实验中我们小组自己培养细胞所测细胞活力为21.4%，并不算高，分析得应有以下原因可能影响实验结果（包括误差）：
⑴若在无菌操作的过程中操作不规范，导致染菌，会极大的影响观察，导致实验失败。
⑵若在离心分离呈单细胞的过程中离心机转速过快或时间过长很可能会导致细胞破裂，导致小鼠脾细胞大量死亡。
⑶染色时间过长，或观察时间过长都会导致染色试剂将细胞杀死，使细胞活力骤降，这是导致细胞活力比较低的重要原因。
⑷实验中的一些操作不正确或不规范的情况、计算带来的误差等也会直接导致实验误差。
⒉注意事项
⑴严格进行动物消毒，需用75%酒精消毒。
⑵严格进行无菌操作，防止细菌、霉菌、支原体污染，避免化学物质污染。
⑶吸取液体前，瓶口和吸管硬行火焰消毒；吸取液体时，避免碰撞。
⑷离心管入台前，管口、管壁应消毒。
⑸实验者离开超净台时，要随时用肘部关闭工作窗。
⑹器材使用时既要注意用火焰消毒，又要防止烫伤、烫死细胞。
霉菌的培养与形态学观察：实验一真菌培养基的配制与灭菌
实验目的：
（1）了解培养基的配置原理和方法，掌握分离培养微生物的有关准备工作。
（2）掌握高压灭菌方法及原理
实验原理：
（1）培养基的制备原理：
培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。
从营养角度分析：
营养：碳源、氮源、能源、生长素、水分和无机盐等；?适宜的酸碱度(pH值)和一定缓冲能力；?一定的氧化还原电位；?合适的渗透压。
琼脂是从石花菜等海藻中提取的胶体物质，是应用最广的凝固剂。加琼脂制成的培养基在98～100℃下融化，于45℃以下凝固，不容易被微生物污染。但多次反复融化，其凝固性降低。
（2）湿热灭菌原理－高压蒸汽灭菌
在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温
度也随之增加。在0.1MPa的压力下，锅内温度达121℃。在此蒸汽温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。
实验材料与方法
配制培养基所需器材
实验设备：高压蒸汽灭菌器。
实验器材：500ml三角烧瓶、蓝盖瓶、5ml刻度吸管、培养基、天平、砝码、
称量纸、药勺、500ml、100ml量筒、牛皮纸、硫酸纸、橡皮筋、铁丝筐、平皿、剪刀等。
培养基等集中放讲台前高压桶内，送到洗刷室统一高压灭菌条件及注意事项
高压灭菌条件：121.3℃，15min。含糖培养基113℃，15min。
倒平板电炉加热灭菌好的培养基打开平皿包装倒平板（10块）注意事项：空气环境无菌（应在酒精灯火焰周围无菌区）。
a.在酒精灯火焰处，倾斜打开瓶口。
b.瓶口要过火焰。
c.左手掀开平皿小口。
d.倾注满皿底再多一点，约10ml（7cm直径平皿）。
e.推放一边要轻缓，不能晃起琼脂挂壁，易在培养过程中污染杂菌。
f.完全凝固再翻转平板放塑料筐内，4℃备用。
分析与讨论
（1）如何证明培养基灭菌是否彻底?
把灭菌后的培养基按灭菌锅内的.不同位置，每处抽取数管(瓶)，标上记号，置25℃～30℃培养一周左右进行检查。如果培养基没有什么变化，说明灭菌效果良好；如果某一位置的培养基出现了杂菌菌落，可能是摆放的太紧，导致蒸汽不畅，或锅的结构不合理等原因所致，应根据上述情况进行改进；如果大部分或全部菌种瓶都出现杂菌，说明灭菌温度或灭菌时间不够，应提高压力或延长灭菌时间。经过几次检验都证明能彻底灭菌后，以后按同样条件灭菌的则不必进行检查。
经过几次检验都证明能彻底灭菌后,以后按同样条件灭菌的则不必进行检查。
（2）为什么说消毒与灭菌是微生物学和临床医学必不可少的基本知识?由于病原生物广泛存在于自然界，可通过不同途径和媒介进入人体，引起感染或造成疾病流行。因此，杀灭或清除存在于体外传播媒介上的病原生物，对于切断传播途径、预防和控制其感染具有重要意义。自古以来，人们就利用煮沸、火烧、日晒等方法杀灭或去除微生物，达到预防疾病的目的。实际上，除了在临床医疗实践中需要防止微生物的污染或感染外，在微生物学实验室、食物保存、饮水净化、药品与生物制品生产等过程中都需要避免微生物的污染。
实验二霉菌的接种与培养
实验目的与要求：掌握霉菌与酵母菌的接种与培养方法。
实验原理：
接种是微生物实验及科学研究中一项基本操作技术。根据实验目的和要求，
选择合适的接种工具与接种方法，接种工具有接种环、接种针、接种铲、接种钩、吸管、滴管、棉签等。常用接种方法有：斜面接种，液体接种，穿刺接种，平板接种和固体接种。接种的关键是无菌操作。
无菌操作的原则：在酒精灯火焰旁进行，所有器皿均须严格消毒，培养基应事先做无菌试验，
接种工具使用前后须经火焰烧灼灭菌，棉塞不能乱放，始终夹在手指中。在培养四大类微生物时应注意选择适宜的培养条件。多数细菌为专性需氧菌与兼性需氧菌，少数为厌氧菌。多数食品腐败菌和工业用菌种，以及人和动物病原菌的最适生长温度为37℃，并且在近中性（PH6.5～7.5）条件下生长良好。多数放线菌为好氧菌，少数为厌氧菌，最适生长温度为28～30℃，多数适宜在偏碱性环境中生长（PH7.5～8.5）。
实验材料与方法
（1）实验材料：实验设备：温箱。
实验器材：毛霉、曲霉、青霉、根霉、啤酒酵母、白假丝酵母、新生隐球酵母菌、细黄链霉菌、PDA平板、高盐察氏平板、高氏合成I号平板、塑料筐、20%甘油水溶液、镊子、接种铲、无菌盖玻片、无菌滤纸、无菌载玻片、石棉网、牛皮纸、硫酸纸、橡皮筋、铁丝筐等。
（2）实验方法：平板接种：毛霉→PDA平板（点植法）
啤酒酵母→PDA平板（五区分离划线法）青霉、曲霉→PDA平板（连续划线法）
小室载玻片培养法：
1、取灭菌后小室平皿。
2、取无菌PDA琼脂薄层平板，用镊子夹住盖玻片切割成0.5～1.0cm2的琼脂块，并将其移至培养小室中的载玻片上，制作过程注意无菌。
3、用接种环取少量霉菌的孢子接种于培养基四周，用无菌镊子
将盖玻片覆盖在琼脂块上，并(转载于:l灭菌的20%甘油（用于保持湿度），盖上皿盖，标记，置28～30℃培养3～5d
粮食产品的平板接种：
1.取粮食样品20g,放入无菌烧杯，加无菌水洗涤，
反复10次，弃去水后，将粮粒倒于平皿内备用2.镊子取粮食种入PDA琼脂内，每皿可接种5-10粒。
放线菌的接种：取细黄链霉菌划线法接种，在接种的划线处，无
菌操作斜插入盖玻片数张。
注意事项：
1.空气环境无菌（应在酒精灯火焰周围无菌区）
2.在酒精灯火焰处，倾斜打开瓶口。
3.接种环使用前，直接在酒精灯上烧灼灭菌，把环和金属丝烧红即可。
4.接种环使用后，先在火焰周围把环上标本烤干，再烧灼灭菌，以免标本汽化，爆烈四溅，污染环境。5.金属杆快速通过火焰2－3次，杀灭表面微生物
分析与讨论
1、粮食中产毒真菌的种类及产生毒素？
青霉、毛霉、曲霉、根霉、酵母、白念、细黄链霉菌（放线菌）青霉素、丝生毛霉素、黄曲霉素、根霉素、白念菌素。细黄链菌素
2、常用霉菌培养基有哪些？
马铃薯蔗糖培养基
豆芽汁葡萄糖（或蔗糖）琼脂培养基察氏培养基
3、霉菌的接种方法有何不同？为什么？
（1）连续划线法（青霉、曲霉）
青霉与曲霉为局限性生长的霉菌。应采用连续划线接种法接种。（2）点植法（根霉、毛霉）
根霉与毛霉生长区域比较大，应采用点植法。（3）小室载玻片培养法（青霉、毛霉、根霉、曲霉）
实验三霉菌的制片与形态观察
实验目的：学习并掌握观察霉菌形态的基本方法；
了解四类常见霉菌的基本形态特征。了解放线菌的基本形态特征。
实验原理：霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多（约为3-10μm）,常是细
菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍显微镜即可观察。霉菌菌丝较粗大，细胞易收缩变形，且孢子容易飞散，所以制标本时常用乳酸石炭酸棉蓝染色液，用此染液做霉菌制片的特点是细胞不变形，具有杀菌、防腐作用，不易干燥，能保持较长时间，能防止孢子四处飞散，棉兰具有一定的染色作用，染液的蓝色能增大反差。
实验材料：
（一）菌种：在马铃薯琼脂平板上培养3—4天的青霉(Penicilliumsp.)、曲霉(Aspergillussp.)、毛霉（Mucorsp.）、根霉；
（二）器材及用具：镊子、载玻片、盖玻片、显微镜。
实验方法：
（一）直接制片观察
于洁净载玻片上，用镊子取霉菌菌落的边缘处取小量带有孢子的菌丝，然后小心地盖上盖玻
片。置显微镜下先用低倍镜观察，必要时再换高倍镜（二）小室培养观察
将载玻片直接放低倍镜下观察，再换高倍镜观察。
观察原则：
毛霉：用低倍镜观察孢子囊梗、囊轴等。用高倍镜观察孢子囊孢子的形
状、大小。
根霉：菌丝、孢子同毛霉，注意观察有无假根。
曲霉：在高倍镜下观察菌丝有无隔膜，分生孢子着生位置，辨认分生孢
子梗、顶囊、小梗和分生孢子。
青霉：在高倍镜下观察菌丝有无隔膜，分生孢子梗、副枝、小梗和分生
孢子的形状等。实验结果：
分析与讨论：
青霉和曲霉的形态有哪些异同？
青霉常分布在霉腐变质的水果、蔬菜、粮食和皮革等物体上，菌体直立菌丝的顶端长有扫帚状的结构，结构的每一个分枝上，生有成串的孢子，成熟的孢子呈青绿色，进行孢子生殖。
曲霉广泛分布在谷物、空气和土壤中，曲霉直立菌丝的顶端膨大成球状，球状结构的表面放射状地生有成串的孢子，孢子随曲霉种类的不同而呈黄色、橙色或黑色。
从皮肤取材查真菌如何检查？
实验日期：年月日
组长：组员：
一、实验要求
1、练习使用显微镜，学习规范的操作方法。
2、能够独立操作显微镜。
3、能够将玻片标本移动到视野中央，并看到清晰的图像。
二、实验原理
三、材料用具
显微镜，写有“上”字的玻片，动物、植物玻片标本，擦镜纸，纱布。
四、方法与步骤
（一）取镜和安放
1、右手握住镜臂，左手托住镜座
2、把显微镜放在实验台上，略偏左。安装好目镜和物镜。
（二）对光
3、转动转换器，使低倍物镜对准通光孔（物镜的前端与载物台要保持2厘米的距离）。
4、把一个较大的`光圈对准通光孔。左眼注视目镜内（右眼睁开，便于以后同时画图）。转动反光镜，使光线通过通光孔反射到镜筒内。通过目镜，以看到白亮的视野。
（三）观察
5、把所要观察的玻片标本（也可以用印有“e”字的薄纸片制成）放在载物台上，用压片夹压住，标本要正对通光孔的中心。
6、转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓下降，直到物镜接近玻片标本为止（眼睛看着物镜，以免物镜碰到玻片标本）。
7、左眼向目镜内看，同时反方向转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓上升，直到看清物像为止。再略微转动细准焦螺旋，使看到的物像更加清晰。